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免疫印跡實驗

簡要描述:免疫印跡實驗:免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。

  • 更新時間:2022-12-23
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詳細介紹

免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Western blotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術。由于免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。結(jié)合化學發(fā)光檢測,可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。

將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然后取固定化基質(zhì)膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉(zhuǎn)移到印跡紙上, 并且固相化。后應用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質(zhì)膜進行檢測和分析。

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